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歐洲藥典中,關(guān)于「支原體檢測(cè)」的那些事

更新時(shí)間:2022-09-09  |  點(diǎn)擊率:918

歐洲藥典

&

支原體檢測(cè)

檢測(cè)限

特異性

耐用性

歐洲藥典近二十年來(lái),已先后出了好幾版,早在2007年版就曾提到支原體的NAT法(即核酸擴(kuò)增技術(shù),如PCR,熒光定量PCR等)。

歐洲藥典強(qiáng)調(diào)了對(duì)核酸檢測(cè)方法的驗(yàn)證,包括檢測(cè)限、特異性和耐用性。

檢測(cè)限

在檢測(cè)限方面,歐洲藥典指出,核酸擴(kuò)增法如替代藥典規(guī)定的培養(yǎng)法,其檢測(cè)限需達(dá)到10CFU/ml,如替代指示細(xì)胞培養(yǎng)法(即DNA染色法),檢測(cè)限需達(dá)到100CFU/ml。也可通過(guò)核酸拷貝數(shù)確定檢測(cè)限,但應(yīng)提前建立CFU與核酸拷貝數(shù)之間的換算關(guān)系。

特異性

在特異性方面,歐洲藥典規(guī)定了NAT法應(yīng)能檢測(cè)污染細(xì)胞的常見(jiàn)的9種支原體,包括:

萊氏無(wú)膽甾原體(A. laidlawii)

發(fā)酵支原體(M.fermentans)

豬鼻支原體(M. hyorhinis)

口腔支原體(M. oral)

精氨酸支原體(M. arginini)

肺炎支原體(M. pneumonia)

雞毒支原體(M. gallisepticum)

滑液支原體(M. synoviae)

螺原體(Spiroplasma citri)

并且,NAT法應(yīng)檢查與細(xì)菌、哺乳動(dòng)物DNA是否有交叉反應(yīng)。

耐用性

那么,進(jìn)行方法驗(yàn)證還需要什么呢?

答案就是:標(biāo)準(zhǔn)品!

標(biāo)準(zhǔn)品好比一把尺子,能確定你所用的支原體PCR或qPCR檢測(cè)試劑盒到底是否符合要求。

舉個(gè)例子:可使用10CFU/管和100CFU/管的支原體標(biāo)準(zhǔn)品,支原體靈敏度套裝囊括了以上提到的9種常見(jiàn)支原體,而且這些支原體都是凍干粉型滅活的,不會(huì)給實(shí)驗(yàn)室?guī)?lái)支原體污染,這一點(diǎn)也令人很放心。


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