潔凈臺、細胞培養(yǎng)箱內(nèi)部、培養(yǎng)箱水槽、液氮罐，培養(yǎng)間內(nèi)部的水浴鍋等環(huán)境被支原體污染，可對工作區(qū)域進行消毒。有以下三種方法：

A、甲醛高錳酸鉀熏蒸消毒

• 40%甲醛溶液用量為10ml/m3，高錳酸鉀用量為5g/m3
• 先將稱好的高錳酸鉀放到開放性容器內(nèi)，然后倒入甲醛溶液
• 人員迅速撤離，密閉消毒空間
• 熏蒸消毒要求密閉消毒24h以上

缺點：甲醛有刺激氣味，細胞間1-2周無法使用。

B、酒精擦拭

• 用75%的酒精對超凈臺、培養(yǎng)箱、桌面等進行擦拭
• 再通風10分鐘
• 紫外照射30分鐘

缺點：操作較為繁瑣，酒精容易揮發(fā)，消毒維持時間不長。 

C、用專門清除支原體的噴霧劑或濕巾消毒 

目前，被各大實驗室普遍使用的是Mycoplasma-off^TM噴霧劑和濕紙巾。它添加了可主動殺除支原體的Mynox®試劑，可在 幾分鐘內(nèi)將支原體確切殺除，無殘留，無腐蝕性，無致癌性。

• 均勻噴于待消毒的潔凈臺或實驗設備表面
• 等待5-10分鐘
• 用干燥紙巾將噴過的表面擦拭干凈
• 通風2-3分鐘

對于移液器，門把手，電話等器材，可使用支原體清除濕巾。擦拭后，應讓其被消毒物體的表面保持濕潤，再讓其自然風干。

D、培養(yǎng)箱水槽、培養(yǎng)間內(nèi)部的水浴鍋

水槽經(jīng)常會成為支原體以及真菌霉菌滋生的污染源。

解決方法：

• 勤于清洗顯得尤為重要。
• 上普遍使用一種水源保護劑0.5%WaterShieldTM，加入水中，預防水源被支原體、真菌、霉菌污染。此試劑不易揮發(fā)。一個月有效。

水槽只需定期添水即可。

優(yōu)點：操作方便，價格便宜。

總之，細胞培養(yǎng)中，支原體污染發(fā)生頻繁。有時帶來的危害會造成實驗的巨大損失。應經(jīng)常檢測和及時排除支原體污染，讓細胞在健康安全的環(huán)境下生長，為獲得準確的實驗結果，打下良好的基礎。

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