李斯特菌動(dòng)力生化試劑盒

HiMotility™Biochemical Kit for Listeria

概況

該試劑盒為標(biāo)準(zhǔn)化的顯色檢測系統(tǒng)，通過李斯特菌特異性的動(dòng)力學(xué)、糖發(fā)酵和生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。微生物的發(fā)酵反應(yīng)，引起培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。

用途

鑒定李斯特菌

使用說明

待鑒定菌種應(yīng)先進(jìn)行分離和純化?？稍?/span>PALCAM瓊脂（貨號(hào)：M1064）上挑取一個(gè)菌落，接種在５ml腦心浸膏肉湯（貨號(hào)：M210）中，在35-37℃培養(yǎng)6-8小時(shí)，直到接種液濁度位于0.5-1.0McFarland標(biāo)準(zhǔn)之間。

無菌打開試劑盒，撕掉封條。劃線接種第1孔，不要接種第2孔。接下來用接種環(huán)接種第3至第12孔。接種液應(yīng)到達(dá)孔底部。在35℃-37℃孵育18-24小時(shí)。

結(jié)果判定

依據(jù)結(jié)果詮釋表。在24-48小時(shí)孵育期結(jié)束后，在第4孔、第5孔和第6孔，分別添加如下試劑：

1) 動(dòng)力試驗(yàn)+七葉苷水解試驗(yàn)：第1孔和第2孔

動(dòng)力：有動(dòng)力則菌落生長從第1孔轉(zhuǎn)移到第2孔，伴隨培養(yǎng)基變黑。

七葉苷水解：陽性則第1孔變黑，有動(dòng)力則第2孔也變黑。

2）觸酶試驗(yàn)：第3孔

用接種環(huán)刮取第1孔內(nèi)表面，將接種環(huán)蘸到含3%H₂O₂的干凈小試管中。

接種環(huán)表面冒泡為陽性。

接種環(huán)表面沒有冒泡為陰性。

注意：3%的H₂O₂需新鮮配置。

3）硝酸鹽還原試驗(yàn)：第4孔

加1-2滴對(duì)氨基苯磺酸（貨號(hào)：R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（貨號(hào)：R009）

立即出現(xiàn)粉紅色為陽性

顏色無變化為陰性

4）伏-普試驗(yàn)：第5孔

加3-4滴Barritt試劑A(貨號(hào)：R029)和1-2滴Barritt試劑B（貨號(hào)：R030）

10分鐘內(nèi)出現(xiàn)粉紅色為陽性

無顏色變化或有輕微變化為陰性。

5）甲基紅試驗(yàn)：第6孔

加1-2滴甲基紅試劑（貨號(hào)：I007）

試劑保持紅色為陽性

試劑脫色變黃為陰性

6）糖發(fā)酵試驗(yàn)：第7孔-第12孔

酸產(chǎn)生導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色由紅變黃，為陽性反應(yīng)。

如果仍保持紅色，則為陰性。

12種生化反應(yīng)

鑒定的李斯特菌物種

格氏李斯特氏菌（Listeria grayi）

單核細(xì)胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）

英諾克李斯特菌（Listeria innocua）

斯氏李斯特氏菌（Listeria seeligeri）

伊氏李斯特氏菌伊氏亞種（Listeria ivannovii Sub sp. ivannovii）

伊氏李斯特菌倫敦亞種（Listeria ivannovii Sub sp. londoniesis）

威氏李斯特氏菌（Listeria welshimeri）

儲(chǔ)存條件及保質(zhì)期

2℃-8℃；12個(gè)月